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离心机原理机类型及利用

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离心机原理机类型及利用

发布日期:2019-07-20 作者: 点击:

离心是一种分离物质的技术,其涉及施加离心力。

根据颗粒的大小,形状,密度,介质粘度和转子速度将颗粒与溶液分离。

离心原理

在溶液中,密度高于溶剂沉降物(沉淀物)的颗粒和比其轻的颗粒漂浮到顶部。

密度差异越大,移动速度越快。如果密度没有差异(异种条件),颗粒保持稳定。

为了利用密度的微小差异来分离溶液中的各种颗粒,重力可以用离心机提供的更强大的“离心力”代替。

离心机是一种设备,它使物体围绕固定轴旋转(将其旋转成圆形),施加垂直于旋转轴(向外)的潜在强力。

离心机使用沉降原理工作,其中向心加速度导致更密集的物质和颗粒沿径向向外移动。

同时,密度较小的物体会移位并移动到中心。

在使用样品管的实验室离心机中,径向加速度导致更密集的颗粒沉降到管的底部,而低密度物质上升到顶部。 

低速离心机

大多数实验室都有标准的低速离心机,用于重粒子的常规沉淀

低速离心机的最高速度为4000-5000rpm

这些仪器通常在室温下运行,无法控制温度。

其中使用了两种类型的转子。

固定角度

摇摆桶。

用于红细胞的沉降,直到颗粒紧密地包装成颗粒并通过倾析分离上清液。

高速离心机

高速离心机用于更复杂的生化应用,转子室的更高速度和温度控制是必不可少的。

高速离心机的最高速度为15,000 - 20,000 RPM

该仪器的操作员可以仔细控制敏感生物样品所需的速度和温度。

有三种类型的转子可用于高速离心

固定角度

摇摆桶

垂直转子

超速离心机

它是最复杂的工具。

超速离心机的最高速度为65,000 RPM(100,000sxg)。

由于高速产生强烈的热量,因此纺纱室必须冷藏并保持高真空。

它用于制备工作和分析工作。

差速造粒(差速离心)

这是最常用的离心方式。

将肝脏等组织在含有缓冲液的蔗糖溶液中均质化32度。

然后将匀浆置于离心机中并在恒定的恒定离心力下旋转。

一段时间后,在离心机底部形成沉淀物,称为沉淀物,上覆溶液称为上清液。

然后将上覆的溶液置于另一个离心管中,然后在进行的步骤中以更高的速度旋转。

密度梯度离心

这种类型的离心主要用于净化病毒,核糖体,膜等。

通过在离心管中在较高浓度下轻轻覆盖较低浓度的蔗糖来产生蔗糖密度梯度

将感兴趣的颗粒置于梯度的顶部并在超离心机中离心。

颗粒穿过梯度,直到它们的密度与周围蔗糖的密度相匹配。

去除并分析该部分。

速率 - 区域密度 - 梯度离心

区带离心也称为带式或梯度离心

它依赖于沉降系数的概念(即沉积物通过液体介质的运动)

在该技术中,在试管中产生密度梯度,底部具有蔗糖和高密度。

将蛋白质样品置于梯度的顶部,然后离心。

通过离心,样品中较快沉积的颗粒在较慢的颗粒之前移动,即样品在梯度中分离为区域。

蛋白质根据其沉降系数沉淀,并通过在管底部形成孔来收集馏分。

异构离心

将样品装入具有梯度形成溶液的管中(在预先形成的梯度的顶部或下方,或与自形成梯度混合)

将生物样品和铯盐的溶液均匀地分布在离心管中并在超离心机中旋转。

在离心力的影响下,铯盐重新分布以形成从顶部到底部的密度梯度。

粒子移动到其浮子密度等于梯度和形成带的部分的位置。也就是说,样品分子移动到其密度等于梯度密度的区域。

这是一个“真正的”均衡程序,因为它取决于buoyant密度,而不是速度

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 离心机原理机类型及利用


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